目錄

1 納米抗體介紹

2 納米抗體的應(yīng)用

3 納米抗體的前景

4 納米抗體的抗體庫建立和篩選以及制備

5 納米抗體的全球競爭格局

6 國內(nèi)抗體產(chǎn)業(yè)投資分布

一

納米抗體介紹

納米抗體(nanobody,Nb)， 即重鏈單域抗體VHH(variable domain of heavy chain of heavy-chainantibody)——駱駝體內(nèi)存在著天然缺失輕鏈的重鏈抗體(heavy-chain antibody,HCAb)，克隆其可變區(qū)VHH而得到的只由一個(gè)重鏈可變區(qū)組成的單域抗體，是目前可以得到的具有完整功能的穩(wěn)定的可結(jié)合抗原的最小單位。其相對分子質(zhì)量為15000，僅為常規(guī)抗體的1/10左右，分子高度4.8 nm，直徑2.2 nm，為納米級，故被稱為納米抗體。

駱駝重鏈抗體的VHH和人抗體重鏈可變區(qū)VH結(jié)構(gòu)非常相似，包含三個(gè)高變區(qū)(hypervariableregion,HVR)和其兩側(cè)的四個(gè)骨架區(qū)(frameworkregion,FR)，且其基因同源性達(dá)90%。 VHH由兩個(gè)β片層形成支架，三個(gè)高變區(qū)聚集在一側(cè)參與抗原識別。通過比較可以看出：與駱駝的重鏈抗體相比，納米抗體僅由重鏈可變區(qū)組成。

抗體結(jié)構(gòu)示意圖

(A) 傳統(tǒng)四鏈結(jié)構(gòu)抗體； (B) 駱駝血液中的重鏈抗體； (C)穩(wěn)定的可結(jié)合抗原的最小單位VHH即納米抗體

1. 納米抗體分類

利用納米抗體所具有的特性，對其進(jìn)行基因改造，可轉(zhuǎn)變?yōu)槎喾N形式，攜帶某些特定的結(jié)構(gòu)，用于疾病的診斷和治療。

單價(jià)納米抗體

即用特異性的抗原從納米抗體庫中篩選得到的抗原特異性的納米抗體，因其表面有大量的親水殘基，能保持嚴(yán)格的單體結(jié)構(gòu)，且僅以這種單體形式就能高特異性、高親和力地與其抗原相結(jié)合。納米抗體具有嚴(yán)格的單體結(jié)構(gòu)，能防止蛋白質(zhì)聚集，一些納米抗體甚至能清除已形成的聚集體。

多價(jià)和多特異性納米抗體

多價(jià)抗體是識別同一種表位的單價(jià)抗體的聚合物，比單價(jià)抗體具有更高的抗原親和力；多特異性抗體是識別不同表位的單價(jià)抗體的聚合物，能結(jié)合不同靶目標(biāo)或同一靶目標(biāo)的不同表位，比單價(jià)抗體具有更高的抗原識別能力。而納米抗體結(jié)構(gòu)簡單，只有一個(gè)結(jié)構(gòu)域，可通過短小的連接序列聚合在一起,從而轉(zhuǎn)換成多價(jià)和多特異性的形式。

融合型納米抗體

納米抗體具有嚴(yán)格的單體特點(diǎn)且其相對分子質(zhì)量很小，很容易通過基因工程技術(shù)與其他結(jié)構(gòu)(如BSA、IgG-Fc等)結(jié)合形成新的融合分子，如能延長其半衰期的酶、抗菌肽或顯影物質(zhì)等。在新的融合分子中，納米抗體與其靶抗原定向結(jié)合，與納米抗體融合的部分就能發(fā)揮相應(yīng)的功能。進(jìn)行疾病治療時(shí)，我們希望藥物能在體內(nèi)靶器官停留較長的時(shí)間以便提高藥物的作用，然而納米抗體的血液清除速度卻很快，不利于它所攜帶的藥物發(fā)揮作用。所以，通過基因技術(shù)將納米抗體VHH和壽命較長的分子融合在一起，可以提高納米抗體在血液中的存在時(shí)間即延長其半衰期，從而達(dá)到更好的治療效果。

另外，納米抗體可連接各種顯影物質(zhì)用于疾病診斷。因其具有高度的靶向性和特異性，通過改變造影劑外殼的組成成分，或在外殼上連接針對組織特異性抗原的抗體或特異受體的配體，可構(gòu)建針對特定組織的靶向超聲造影劑。加之納米抗體的強(qiáng)穿透力，能穿過血管進(jìn)入組織，可更好地應(yīng)用于顯像和治療：如連接綠色熒光蛋白(GFP)和VHH形成復(fù)合物，這種復(fù)合物能靶向地結(jié)合到活細(xì)胞，可用于疾病的診斷。

不同類型的納米抗體

2. 納米抗體的結(jié)構(gòu)特征

體積小

相對于普通抗體的6個(gè)互補(bǔ)決定區(qū)(complementaritydetermining region, CDR)，Nb僅有的3個(gè)CDR就具備了特異的抗原結(jié)合能力和高親合力，具有完整的抗原結(jié)合片段。

抗原結(jié)合環(huán)的結(jié)構(gòu)大

納米抗體的抗原結(jié)合環(huán)的結(jié)構(gòu)組成比普通抗體VH更大，其CDR1和CDR3比VH的更長——人和小鼠VH的平均長度分別只有14和12個(gè)氨基酸， 而納米抗體的CDR3長度為16～18個(gè)氨基酸，加上納米抗體包含了骨架區(qū)的氨基酸殘基, 就決定了納米抗體能補(bǔ)償抗原結(jié)合位點(diǎn)輕鏈可變區(qū)VL的缺乏。

FR2區(qū)氨基酸殘基改變并存在二硫鍵

納米抗體VHH表面大概只有10個(gè)氨基酸和人VH不同，其中在FR2位置有四個(gè)特異的氨基酸：普通抗體的FR2中V37、G44、L45和W47這4個(gè)氨基酸殘基是在進(jìn)化中相當(dāng)保守的疏水性殘基；而在VHH中，它們突變?yōu)橛H水性的氨基酸殘基F37、E44、R45、G47，增加了VHH的溶解性。VHH的CDR1區(qū)和骨架區(qū)FR2存在半胱氨酸殘基(Cys)，可以和CDR3區(qū)中的Cys殘基形成二硫橋，增加了可變區(qū)的穩(wěn)定性和結(jié)構(gòu)變化。

納米抗體FR2區(qū)中特殊的親水性氨基酸殘基的改變和CDR3區(qū)二硫鍵的存在，使得其穩(wěn)定性和親水性也遠(yuǎn)遠(yuǎn)優(yōu)于傳統(tǒng)的IgG抗體。

VH 和VHH 結(jié)構(gòu)示意圖

3. 納米抗體相比傳統(tǒng)抗體的突出優(yōu)勢

高水溶性、 高耐性和穩(wěn)定性

正?？贵wVH結(jié)構(gòu)域單獨(dú)表達(dá)時(shí)通常形成包涵體，或者暴露的疏水域相互黏附；而納米抗體VHH由于其FR2中的疏水殘基被親水殘基所取代，使得納米抗體的水溶性增加，聚合性減少；而且即使以包涵體形式表達(dá)，也很容易復(fù)性，這樣可以大大提高作為藥物的利用率。

研究發(fā)現(xiàn)，一些納米抗體能耐高溫且具有高度的構(gòu)象穩(wěn)定性。將不同的納米抗體在37℃放置1周，結(jié)果其抗原結(jié)合活性仍均在80%以上，表明納米抗體在室溫下保存相當(dāng)穩(wěn)定，這使其比常規(guī)抗體更易于儲藏和運(yùn)輸。

另外,納米抗體具有可逆的去折疊能力即易復(fù)性，VanderLinden等比較了鼠單抗和納米抗體在90℃高溫長時(shí)間處理的抗原結(jié)合活性，發(fā)現(xiàn)納米抗體都保持了較高的活性仍能重新獲得抗原結(jié)合能力，而所有常規(guī)抗體在90℃處理后都喪失了活性，發(fā)生了不可逆的聚合。而在惡劣條件，如在離液劑、存在蛋白酶和極度pH值變性的條件下(如胃液和內(nèi)臟中)，正?？贵w會失效或分解，而納米抗體仍具有高度的穩(wěn)定性。

低免疫原性

免疫原性是指能夠刺激機(jī)體形成特異性抗體或致敏淋巴細(xì)胞的能力，與分子大小、化學(xué)結(jié)構(gòu)等有關(guān)，相對分子質(zhì)量越小免疫原性越小。納米抗體因其相對分子質(zhì)量很小且只有一個(gè)結(jié)構(gòu)域，所以對人體的免疫原性較弱，與人的生物相容性較好。在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中，納米抗體的重復(fù)給藥未引起任何體液和細(xì)胞免疫應(yīng)答 (但有報(bào)道稱若長期重復(fù)的臨床使用也會產(chǎn)生潛在的免疫原性，有待人們?nèi)ジ纳?。因此，可通過帶有人同類骨架區(qū)VHFR2烙印的納米抗體來獲得非免疫原性的納米抗體。

較強(qiáng)的組織穿透力

納米抗體具有強(qiáng)而快的組織穿透能力，可以進(jìn)入致密的組織如實(shí)體瘤等發(fā)揮作用；并且多余未結(jié)合的納米抗體能夠很快的被清除，這相對于單克隆抗體組織穿透力差、不易被清除的不足，更有利于疾病的診斷。另外，納米抗體能夠有效的穿透血腦屏障，這樣的特性為腦部給藥提供了新方法，有望成為治療老年癡呆癥的新藥。CortezRetamozo等等制備的納米抗體顯影劑呈現(xiàn)出了穿透性好、親和力高、腫瘤組織的顯像效果好，并且對正常組織幾乎沒有損傷等優(yōu)點(diǎn)。

高表達(dá)性

因納米抗體相對分子質(zhì)量小、結(jié)構(gòu)簡單，由單一基因編碼，所以它很容易在微生物中合成，能在噬菌體、酵母等微生物中大量的表達(dá)，而且其相對價(jià)格低廉、可進(jìn)行大規(guī)模生產(chǎn)，易于普及和應(yīng)用。可通過酵母反應(yīng)器釀造將納米抗體的產(chǎn)量提高至每公升1g。

4. 納米抗體的不足

納米抗體最大的缺陷是半衰期較短。與常規(guī)抗體相比，納米抗體具有更快的血清清除速度，使得其在體內(nèi)成像方面大展身手的同時(shí)，也限制了其在治療領(lǐng)域的應(yīng)用。

為延長納米抗體在血液中的半衰期，解決方法有聚乙二醇化、與白蛋白結(jié)合或融合、與抗體的Fc融合。

較成功的有Coppieters等通過構(gòu)建雙特異性抗體的方法，將特異性抗腫瘤壞死因子納米抗體和抗血清白蛋白納米抗體偶聯(lián)，以延長在血清中的半衰期；Harmsen等使用聚乙二醇化的方法也成功延長了中和手足口病的納米抗體的半衰期；此外，Hmila等將VHH片段和人Fc段連接在一起，同樣有效延長了抗體在體內(nèi)半衰期。

二

納米抗體應(yīng)用

1. 疾病體外檢測

納米抗體具有較強(qiáng)的表位識別與結(jié)合能力，其構(gòu)建及表達(dá)過程甚至不需要純化的抗原。納米抗體體積小，使其能夠以高密度牢固地結(jié)合于固相載體捕捉微量抗原。這些特性是常規(guī)單抗甚至單域抗體所不及的。因此，可以充分發(fā)揮以納米抗體為基礎(chǔ)的免疫檢測方法的作用，檢測與鑒別臨床上較難檢出的靶點(diǎn)以及外來病原物或毒素。

EGFR在許多腫瘤中過度表達(dá)，并且是腫瘤藥物靶向的極具吸引力的靶點(diǎn)。目前已開發(fā)了靶向EGFR的納米抗體。并成功應(yīng)用于乳腺癌、卵巢癌、前列腺癌的診斷。

2. 體內(nèi)無創(chuàng)傷診斷

納米抗體與靶點(diǎn)結(jié)合的高親合力、高特異性和優(yōu)良的組織穿透能力，使其可以被用作靶向示蹤分子進(jìn)行特異的放射免疫顯像或靶向超聲造影。因此，以納米抗體為基礎(chǔ)的病灶組織特異的靶向示蹤成為分子成像領(lǐng)域重要的研究方向。

1）放射免疫顯像

放射免疫顯像是指將放射性核素通過一定方法標(biāo)記到抗體上，利用抗體與抗原的免疫結(jié)合，特異定位到表達(dá)一定抗原的病灶組織上，通過核素發(fā)出的射線進(jìn)行腫瘤特異性顯像。

目前，基礎(chǔ)研究和臨床實(shí)際應(yīng)用還有一定差距。需要改進(jìn)的是納米抗體（Nb）與放射性核素的標(biāo)記技術(shù)放射性核素的種類非常多，在選擇用于放免顯像的核素時(shí)，從與Nb的配伍標(biāo)記角度出發(fā)，一般要考慮兩個(gè)因素：1)核素合理的物理半衰期：由于Nb的半衰期較短，因此，核素的半衰期不能過短。2)核素應(yīng)為無載體形式；Nb的氨基酸構(gòu)成一般不足140個(gè)，其與核素結(jié)合的特定位點(diǎn)有限。因此，只有無載體形式的核素才能得到具有高比活度的標(biāo)記抗體，這也是獲得良好顯像的前提。

放射性核素標(biāo)記抗體的方法分為直接和間接法。直接標(biāo)記法是放射性核素直接與抗體分子形成價(jià)鍵結(jié)合而實(shí)現(xiàn)標(biāo)記。這種標(biāo)記方法步驟簡單，易于實(shí)現(xiàn)，但能用于直接標(biāo)記法的核素有限。間接標(biāo)記法則是通過聯(lián)接劑將核素標(biāo)記在抗體之上，在保持Nb免疫括性的前提下，提高標(biāo)記率和標(biāo)記物的穩(wěn)定性至關(guān)重要，因?yàn)樗苯佑绊懼鴺?biāo)記物的生物分布和體外顯像質(zhì)量。

2）靶向超聲造影

靶向超聲造影是指將特異性抗體或配體連接到超聲造影劑表面，使其能主動(dòng)地與病變組織上相應(yīng)的抗原或受體靶向結(jié)合，并通過超聲造影技術(shù)顯示靶灶部位分子水平病理變化，從而產(chǎn)生特異性的分子顯像。

為了在體內(nèi)快速而準(zhǔn)確地檢測腫瘤所在位置，理想的顯影劑應(yīng)具備良好的組織滲透性，高抗原親和力，非特異性噪聲背景低，未結(jié)合靶抗原的抗體能迅速清除，將放射損傷程度降到最低。CortezRetamozo等以單域抗體作為靶向分子構(gòu)建的顯影劑穿透性好，親和力高，在數(shù)小時(shí)內(nèi)腫瘤組織的顯像效果明顯提高，在正常的組織中沒有發(fā)現(xiàn)顯影劑的存在。

3. 腫瘤靶向治療

納米抗體自身的高親合力和特異性，使得它更容易在阻塞部位與癌癥細(xì)胞上的受體靶向結(jié)合，滲入到血管少的組織內(nèi)。同時(shí)鑒于納米抗體的低免疫原性，將納米抗體對小鼠進(jìn)行重復(fù)給藥，經(jīng)檢測，沒有引起任何體液和細(xì)胞免疫反應(yīng)。

由于納米抗體可以用于構(gòu)建多種分子結(jié)構(gòu)，從而可以進(jìn)行一些分子輔助治療。如將納米抗體與陰溝腸桿菌β內(nèi)酰胺酶相結(jié)合，試驗(yàn)證明，此結(jié)合物能選擇性的激活抗癌前體藥物，有效的與結(jié)腸腺癌細(xì)胞上的癌胚抗原相結(jié)合，在原位殺傷腫瘤，從而建立了一種腫瘤異種移植物的治療方法，且無毒副作用。

跨越血腦屏障治療神經(jīng)系統(tǒng)疾病是目前科學(xué)家開發(fā)和研究的重點(diǎn)內(nèi)容。納米抗體能跨越人的血腦屏障內(nèi)皮細(xì)胞，促進(jìn)藥物的運(yùn)輸，為腦部給藥提供了新的方法。

藥企相繼開發(fā)了靶向EGFR、HER2、VEGFR2、c-Met、CXCR7等抗腫瘤納米抗體。

納米抗體在抗腫瘤靶標(biāo)方面的研究進(jìn)展

資料來源：《納米抗體用于腫瘤診斷與治療的研究進(jìn)展》

4. 神經(jīng)系統(tǒng)疾病

納米抗體可用于治療淀粉樣變疾病。老年癡呆癥是一種致死性神經(jīng)退行性疾病。其病理特征為β－淀粉樣蛋白的沉積。運(yùn)用噬菌體展示技術(shù)和原子力顯微鏡觀察技術(shù)，發(fā)現(xiàn)分離出的E1納米抗體可以選擇性識別、對抗Ａβ低聚物，使E1具備與其他治療方法相結(jié)合治療AD的潛在價(jià)值。比利時(shí)納米抗體藥企Ablynx已開發(fā)出三株抗老年性癡呆的納米抗體。

此外，一些納米抗體甚至能清除已聚合成的聚集體，并在細(xì)胞內(nèi)發(fā)揮作用。因而它還可以用來治療其他淀粉樣變疾病，如帕金森病及眼咽型肌營養(yǎng)不良癥。

5. 循環(huán)系統(tǒng)疾病

納米抗體可制成抗血栓藥物。比利時(shí)Ablynx公司研制出了一種納米抗體藥物——Ablynx。其中的一種ALX-0081能選擇性地阻止血栓的形成。在狒狒的安全模型檢測急性血栓形成試驗(yàn)中，與傳統(tǒng)的抗栓藥物相比，ALX-0081表現(xiàn)出了優(yōu)越的治療窗帶。

6. 感染性疾病

納米抗體用于治療輪狀病毒引起的腹瀉。Pant N等對乳酸菌治療小鼠腹瀉試驗(yàn)中，通過口服給藥時(shí)，乳酸桿菌表面所表達(dá)的VHH能夠縮短病程、減輕病癥，降低由于輪狀病毒引起腹瀉導(dǎo)致的小鼠死亡率。據(jù)此，可給兒童服用結(jié)合了納米抗體的活菌制劑，從而有效地預(yù)防治療輪狀病毒引起的腹瀉，且顯著降低治療成本。

納米抗體還可用于預(yù)防及治療錐蟲病、禽流感檢測和治療、鑒別布魯菌。

7. 其他疾病類型

納米抗體還可用于消化系統(tǒng)疾病、食物中毒檢測與治療等方向。

治療性納米抗體研究進(jìn)展

資料來源：生物制藥小編

臨床階段品種有應(yīng)用于治療自身免疫病、癌癥、血液疾病、病毒感染、骨科疾病、神經(jīng)退行性疾病產(chǎn)品，除了進(jìn)入臨床研究階段的納米抗體，拓展指引在研項(xiàng)目研究方向有抗腫瘤、抗感染、抗炎癥性疾病、神經(jīng)退行性疾病。

三

納米抗體前景

• 口服來調(diào)節(jié)機(jī)體免疫
• 檢測和治療腫瘤
• 診斷探測探針
• 開發(fā)雙抗夾心法ELISA檢測流感等病毒
• VHH非免疫球蛋白支架作為很高的蛋白黏合劑
• 畜牧獸醫(yī)領(lǐng)域疾病的臨床治療和診斷檢測

四

納米抗體的抗體庫建立和篩選以及制備

1. 納米抗體的抗體庫建立和篩選

重鏈抗體來源的納米抗體由于結(jié)構(gòu)簡單，相對于Fab、scFv等片段更容易正確折疊，所以在進(jìn)行噬菌體抗體庫的構(gòu)建和篩選方面也更加具有優(yōu)勢。此外，有實(shí)驗(yàn)室依據(jù)納米抗體表達(dá)穩(wěn)定、相對分子質(zhì)量小的特點(diǎn)，結(jié)合酵母雙雜交的技術(shù)，開發(fā)出在酵母細(xì)胞內(nèi)進(jìn)行胞內(nèi)抗體篩選的技術(shù)。

2. 納米抗體的制備

1）利用細(xì)菌生產(chǎn)

大量的VHH已經(jīng)可以借助細(xì)菌進(jìn)行生產(chǎn)。VHH可以在埃希氏桿菌屬的大腸桿菌細(xì)胞周質(zhì)或者細(xì)胞質(zhì)中大量表達(dá)。通過標(biāo)記VHH在細(xì)胞周質(zhì)間隙形成二硫鍵，細(xì)胞周質(zhì)提取物中的VHH就很容易被純化。

有時(shí)還原性的細(xì)胞質(zhì)阻礙功能蛋白的形成，為克服這種限制，有學(xué)者把VHH融合到細(xì)胞質(zhì)中穩(wěn)定的蛋白質(zhì)，或者在互補(bǔ)性決定區(qū)連接一種具有穩(wěn)定性的普通VHH支架。也有人通過高通量測序和生物刷選的方法分離鑒定抗特異性抗原的抗體。

2）利用真菌生產(chǎn)

在真菌中，一般利用酵母菌的高表達(dá)特性，進(jìn)行VHH的大量生產(chǎn)。通過釀酒酵母S．cerevisiae生產(chǎn)71種不同的VHH，實(shí)踐中，生產(chǎn)水平上有100倍的差別，從1mg/L～100mg/L，而且生產(chǎn)水平受酵母菌分泌物效率的影響。可能后者主要是與VHH的疏水性和VHHC端相似的J編碼片段有關(guān)。從畢赤酵母中可以純化(8～18)mg/L。然后在實(shí)驗(yàn)室平臺上酵母的每升毫克級生產(chǎn)量轉(zhuǎn)移到高細(xì)胞密度發(fā)酵罐中實(shí)現(xiàn)每升克級(g/L)的生產(chǎn)量。很高的積累水平和直接純化的特點(diǎn)已經(jīng)使畢赤酵母在工業(yè)中作為首選來大量生產(chǎn)。VHH(Ablynx公司)。

3）利用哺乳動(dòng)物細(xì)胞系生產(chǎn)

哺乳動(dòng)物細(xì)胞系有分泌折疊糖蛋白的能力和固定的管理調(diào)控路徑，一般被應(yīng)用于糖蛋白的工業(yè)生產(chǎn)。VHH很容易在細(xì)菌和真菌中生產(chǎn)，然而在哺乳動(dòng)物細(xì)胞系中生產(chǎn)還未被評估。希望下一代VHH-Fc抗體能夠提高親和功能和延長血清半衰期，預(yù)期在哺乳動(dòng)物細(xì)胞系中生產(chǎn)水平能夠達(dá)到100mg/L。

4）利用植物生產(chǎn)

由于在哺乳動(dòng)物細(xì)胞系中進(jìn)行VHH生產(chǎn)成本相對昂貴，植物生產(chǎn)系統(tǒng)被認(rèn)為是非常有價(jià)值的選擇，也可以避免人類病原細(xì)菌的污染。

在擬南芥種子中，VHH和VHH-Fc二聚體抗體最大表達(dá)水平分別可以達(dá)到總?cè)诤系鞍椎?.13%和16%。在大米種子中，抗輪狀病毒VHH的生產(chǎn)水平達(dá)到總?cè)诤系鞍椎?1.6%。這些含有VHH的種子不需要提純，容易消化，煮沸VHH可以產(chǎn)生抗熱變性，遇冷后可以復(fù)性，也提供很高的抵抗力。

5）利用昆蟲生產(chǎn)

專家已經(jīng)提議從有菌環(huán)境下的活昆蟲中廉價(jià)、大規(guī)模地生產(chǎn)抗輪狀病毒的VHH。這種VHH目的在于內(nèi)服應(yīng)用，沒有相關(guān)的污染物，所以，昆蟲表達(dá)系統(tǒng)比其他的細(xì)菌和哺乳類表達(dá)系統(tǒng)更具有潛在的應(yīng)用價(jià)值。利用昆蟲表達(dá)系統(tǒng)生產(chǎn)的VHH可以累積達(dá)到總?cè)诤系鞍琢康?.6%，生產(chǎn)的VHH已經(jīng)成功地在小豬中作出評估，在小豬體內(nèi)能充分地保護(hù)機(jī)體抵抗人輪狀病毒珠感染。

VHH制備方法對比

資料來源：探針資本整理

五

納米抗體全球競爭格局分析

據(jù)悉，2015年全球單克隆抗體藥規(guī)模達(dá)916億美元，當(dāng)年增長率7%，預(yù)計(jì)2018年將達(dá)到1122億美元。如果納米抗體能夠替代其中50%的市場份額，則納米抗體的全球市場容量將達(dá)到561億美元。

然而，目前納米抗體行業(yè)才剛剛萌芽。海外市場上，只有比利時(shí)Ablynx公司深耕納米抗體領(lǐng)域，真正做到全球行業(yè)領(lǐng)先。國內(nèi)市場，深圳普瑞金、蘇州康寧杰瑞、蘇州博生吉、南京傳奇生物科技等公司開始探足納米抗體領(lǐng)域。

1. 行業(yè)領(lǐng)軍者Ablynx：世界唯一成熟納米抗體藥物公司

比利時(shí)Ablynx成立于2001年，是目前世界上唯一成熟納米抗體藥物研發(fā)、生產(chǎn)公司。

Ablynx擁有多達(dá)40多個(gè)候選藥物，應(yīng)用于癌癥、自身免疫病、呼吸系統(tǒng)疾病、血液系統(tǒng)疾病等多個(gè)不同領(lǐng)域。Ablynx在納米抗體領(lǐng)域擁有絕對的領(lǐng)導(dǎo)地位，截止2017年9月，已累計(jì)與輝瑞、禮來、諾華、勃林格殷格翰、賽諾菲等國際藥企達(dá)成超過70億歐元的合作。

知識產(chǎn)權(quán)方面，Ablynx申請了500多項(xiàng)專利，構(gòu)建了森嚴(yán)的專利網(wǎng)絡(luò)壁壘，并在全球范圍內(nèi)注冊了Nanobody、Nanoclone的商標(biāo)。工藝方面，Ablynx建立了成熟的畢赤酵母表達(dá)和純化工藝。畢赤酵母表達(dá)產(chǎn)量高達(dá)1g/L。2018年1月Ablynx公司被賽諾菲39億歐元并購。

Ablynx豐富研發(fā)線

資料來源：醫(yī)藥網(wǎng)

2. 深圳普瑞金：融合納米抗體的CAR-T細(xì)胞藥物平臺

普瑞金科技成立于2012年11月，是擁有獨(dú)家自主知識產(chǎn)權(quán)的融合納米抗體平臺，國內(nèi)較早致力于按照藥物標(biāo)準(zhǔn)研發(fā)CAR-T療法的細(xì)胞藥物專業(yè)公司。

普瑞金投資建立羊駝養(yǎng)殖與抗體免疫研發(fā)基地，搭建了納米抗體技術(shù)平臺，自主掌握了全線的抗原制備、免疫抗原、建庫篩選、抗體生產(chǎn)全線納米抗體產(chǎn)業(yè)化技術(shù)，將生產(chǎn)成本降至普通抗體1/10，達(dá)到質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)。

“納米抗體+CAR-T協(xié)同開發(fā)”是普瑞金目前主要的研發(fā)管線。2018年6月14日，普瑞金生物的首個(gè)項(xiàng)目申報(bào)臨床，此次申報(bào)的“靶向CD19的嵌合抗原受體T細(xì)胞注射液”適應(yīng)癥為B細(xì)胞急性淋巴細(xì)胞白血病(B-ALL)，預(yù)計(jì)10月獲得臨床批件。同時(shí)，普瑞金正在進(jìn)行多項(xiàng)CAR-T臨床研究，累計(jì)治療患者近百例。后續(xù)產(chǎn)品管線豐富。

除了將納米抗體用于CAR-T細(xì)胞藥物之外，將拓展納米抗體藥物、診斷等多個(gè)領(lǐng)域，如抗體藥治療自身免疫疾病、老年性黃斑變性等疾病，打造納米抗體技術(shù)產(chǎn)業(yè)鏈。

普瑞金融資情況

資料來源：探針資本整理

3. 蘇州康寧杰瑞：國內(nèi)首家申報(bào)PDL1項(xiàng)目的企業(yè)

蘇州康寧杰瑞生物科技有限公司成立于2009年4月，與東南大學(xué)成立校企共建技術(shù)中心，中科院上海藥物所形成生物大分子藥物戰(zhàn)略合作，與美國Thermo-Fisher公司建立合作實(shí)驗(yàn)室。與腫瘤免疫領(lǐng)域的國際著名學(xué)者共同成立丁孚靶點(diǎn)生物技術(shù)公司，專注腫瘤免疫治療，目前已經(jīng)獲得PD-L1、CD137、OX40等靶點(diǎn)的藥物候選物十多個(gè)，正在逐步進(jìn)入CMC開發(fā)階段。

康寧杰瑞與東南大學(xué)合作，建立了免疫來源的駱駝納米抗體噬菌體展示篩選平臺?？祵幗苋鹄迷撈脚_開發(fā)的PD-L1抗體KN035，已于2016年4月申報(bào)臨床并獲得受理，該產(chǎn)品常溫穩(wěn)定。該項(xiàng)目為特殊審批品種，是國內(nèi)第一個(gè)申報(bào)PDL1項(xiàng)目的企業(yè)，蘇州基石藥業(yè)10月申報(bào)的為第二家。目前主要由其合作方思路迪繼續(xù)開發(fā)，后續(xù)開發(fā)中將與深圳微芯合作，與西達(dá)本胺聯(lián)用，同時(shí)將在中美同時(shí)推進(jìn)。

康寧杰瑞申報(bào)項(xiàng)目

資料來源：藥渡

4. 蘇州博生吉（安科）：開發(fā)一系列CD7納米抗體CAR-T

博生吉成立于2010年5月，作為先行的國內(nèi)免疫細(xì)胞療法開發(fā)公司，擁有國內(nèi)首家CAR-T細(xì)胞/CAR-NK細(xì)胞技術(shù)服務(wù)平臺。2015年6月，安科生物擬出資2000萬增資博生吉，增資完成后將持有博生吉15%的股份，并受讓博生吉擁有的部分細(xì)胞免疫治療技術(shù)、產(chǎn)品及相關(guān)技術(shù)成果。

目前，博生吉已經(jīng)成功構(gòu)建了CD19、CD138、CEA、HER-2等多個(gè)靶點(diǎn)的CAR，博生吉產(chǎn)品與技術(shù)主要包括：（1）細(xì)胞治療技術(shù)與產(chǎn)品：CAR-T技術(shù)、CAR-NK技術(shù)、CTL技術(shù)、DC-CTL技術(shù)；（2）抗體靶向藥物：免疫檢驗(yàn)點(diǎn)抗體、納米抗體等。據(jù)了解，博生吉目前已經(jīng)有3個(gè)CAR-T項(xiàng)目處于臨床II期，研發(fā)進(jìn)度在國內(nèi)處于領(lǐng)先位置。

博生吉公司開發(fā)的一系列CD7納米抗體，具有不同的抗體親和力和抗原識別表位，可以滿足臨床上針對不同的CD7表達(dá)水平的惡性腫瘤的要求。在前期臨床前研究中表現(xiàn)出了良好的殺瘤效果和安全性，2016年獲得專利授權(quán)。目前，博生吉公司正在致力于開發(fā)CD7納米抗體免疫毒素和CD7-CAR-NK細(xì)胞治療產(chǎn)品，產(chǎn)品處于研發(fā)階段。

5. 南京傳奇：國內(nèi)首家CAR-T申報(bào)公司

南京傳奇生物科技有限公司成立于2014年，是南京金斯瑞生物科技有限公司的全資附屬公司。專注于研究和發(fā)展CAR-T免疫治療，在多發(fā)性骨髓瘤的治療上展現(xiàn)了非常優(yōu)異的成績，是國內(nèi)首家CAR-T申報(bào)公司。

LCAR-B38M是南京傳奇研發(fā)的一款搭載納米抗體的靶向B細(xì)胞成熟抗原（BCMA）的CAR-T療法，在中國遞交首個(gè)臨床申請的CAR-T療法。根據(jù)數(shù)據(jù)顯示，在一項(xiàng)35例復(fù)發(fā)性或耐藥性多發(fā)性骨髓瘤患者參與的臨床試驗(yàn)中，該療法的客觀緩解率達(dá)到100%。在最早接受治療的19例患者中，南京傳奇對其觀察隨訪4-14個(gè)月以上。其中14名患者持續(xù)達(dá)到嚴(yán)格完全反應(yīng)診斷標(biāo)準(zhǔn)，5位出現(xiàn)部分緩解。

2017年12月Janssen Biotech以3.5億美金與南京傳奇達(dá)成合作協(xié)議，獲得LCAR-B38M的開發(fā)、生產(chǎn)、以及市場推廣許可。在大中華地區(qū)，Janssen與南京傳奇將以30/70的比例共同承擔(dān)成本和分享收益。在全球的其他地區(qū)，這一比例為50/50。

六

國內(nèi)抗體產(chǎn)業(yè)投資分布

1. 投資簡介

抗體產(chǎn)業(yè)的熱度也吸引了眾多的資本介入，從2012年到2017年上半年抗體藥物企業(yè)共披露融資次數(shù)47次，涉及融資金額達(dá)130億元。從披露投融資情況看，從2015年開始，抗體產(chǎn)業(yè)不管是從融資次數(shù)還是融資金額上都有大幅提升，產(chǎn)業(yè)熱度居高不下，融資次數(shù)和融資金均以A輪和B輪居多，提示我國抗體產(chǎn)業(yè)仍處于上升階段。

近5年國內(nèi)抗體藥物企業(yè)披露投融資金額及筆數(shù)

數(shù)據(jù)來源：火石創(chuàng)造

以高瓴資本、元禾原點(diǎn)、毓承資本、禮來亞洲基金、啟明創(chuàng)投為代表的投資機(jī)構(gòu)為抗體領(lǐng)域的繁榮提供了資本支持。

資本主要投資項(xiàng)目

資料來源：IT桔子等，探針資本整理

2. 投資風(fēng)險(xiǎn)

對于生物創(chuàng)新藥來說，由于其開發(fā)的復(fù)雜性，眾多國內(nèi)企業(yè)選擇合作開發(fā)模式以共擔(dān)風(fēng)險(xiǎn)。由于生物醫(yī)藥專利的復(fù)雜性、抗體領(lǐng)域靶點(diǎn)和技術(shù)的易重疊性，抗體藥物專利問題愈發(fā)突出與明顯，BMS和默沙東的PD1專利大戰(zhàn)、安進(jìn)/賽諾菲關(guān)于PCSK9表位的專利之爭更是為國內(nèi)企業(yè)在抗體領(lǐng)域?qū)＠季智庙懢姟?/p>